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12-222022

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凡納濱對(duì)蝦急性肝胰腺壞死病致病菌的分離鑒定、藥敏特性及其組織病理學(xué)觀察

摘要：為查明上海市奉賢區(qū)某對(duì)蝦養(yǎng)殖場(chǎng)疑似患急性肝胰腺壞死病的凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)的病原菌，本研究從患病凡納濱對(duì)蝦肝胰腺組織分離純化到1株優(yōu)勢(shì)菌FHBX-1,并通過人工回歸感染試驗(yàn)確定其致病性，利用VITEK-2全自動(dòng)微生物鑒定儀和16S rRNA、熱休克蛋白HSP60基因序列分析進(jìn)行綜合鑒定，并檢測(cè)其毒力基因。同時(shí)采用K-B紙片擴(kuò)散法檢測(cè)病原菌的藥物敏感性并通過石蠟切片觀察患病凡納濱對(duì)蝦肝胰腺組織的病理特征。結(jié)果顯示：菌株FHBX-1經(jīng)生理生化特征測(cè)定、16S rRNA和熱休克蛋白HSP60基因序列分析，綜合鑒定為副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus),且攜帶了急性肝胰腺壞死病相關(guān)的毒力基因pirAVP、pirBVP,未攜帶副溶血弧菌臨床主要毒力基因耐熱直接溶血毒素tdh和相對(duì)耐熱直接溶血毒素trh基因。人工回歸感染試驗(yàn)結(jié)果顯示，凡納濱對(duì)蝦在菌液濃度為1.0×10~6 CFU/mL浸泡感染試驗(yàn)組，7 d內(nèi)累計(jì)死亡率為80%,患病凡納濱對(duì)蝦具有肝胰腺顏色變白、萎縮變小，胃腸變空等癥狀，從病蝦再次分離的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌與原攻毒菌FHBX-1特性相同。組織病理學(xué)觀察顯示，患病凡納濱對(duì)蝦肝胰腺上皮細(xì)胞嚴(yán)重脫落，肝小管崩塌，呈典型的AHPND病理特征。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，菌株FHBX-1對(duì)氟苯尼考、多西環(huán)素、恩諾沙星等11種抗菌藥物敏感，對(duì)新霉素、紅霉素中度敏感，對(duì)鏈霉素、慶大霉素等5種抗菌藥物耐藥。本研究可為對(duì)蝦急性肝胰腺壞死病的流行病學(xué)研究及藥物防控提供基礎(chǔ)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：

凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei);急性肝胰腺壞死病;副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus);藥敏特征;

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上海市水產(chǎn)研究所